Το πεδίο εφαρμογής του συστήματος διαχωρισμού υγρής χρωματογραφίας χαμηλής πίεσης: έρευνα και προετοιμασία βιοχημικών, συνθετικών χημικών, φυσικών προϊόντων, ανάπτυξης φαρμάκων, χημείας τροφίμων, γεωργικής χημείας, καλλυντικών, πολυμερών και πετροχημικών βιομηχανιών. Μπορεί να πραγματοποιηθεί στρωματική ανάλυση ανταλλαγής ιόντων, στρωματική ανάλυση φιλτραρίσματος ζελ, υδροφοβική στρωματική ανάλυση και άλλες μεθόδους, που χρησιμοποιούνται για την ανάλυση διαχωρισμού, την ανίχνευση ροής πρωτεϊνών, ενζύμων, νουκλεοξέων, νουκλεοτιδίων, πολυπεπτιδίων, (περιέχοντας / χωρίς αρωματικά αμινοξέα) και οποιασδήποτε άλλης απορρόφησης βιολογικών / μη βιολογικών δειγμάτων με υπεριώδη ισχύ, είναι η ιδανική επιλογή για τον καθαρισμό βιομορίων, έχει πολλές λειτουργίες, εύ Μικρός σχεδιασμός που μεγιστοποιεί την εξοικονόμηση χώρου σε ψυγείο και εργαστήριο.

Σημείωση

Οι διάφορες τεχνικές απαιτήσεις για τους ανιχνευτές υπεριώδους ακτινοβολίας υψηλής απόδοσης στη διαμόρφωση του συστήματος χρησιμοποιούνται για την ποσοτική ανίχνευση του εργοστασίου φαρμάκων σε εθνικά φαρμακευτικά εργοστάσια. Χαρακτηριστικά του εξοπλισμού

Διπλό μήκος κύματος πρωτεΐνης 280nm/254nm

Τα μόρια πρωτεΐνης περιέχουν αρωματικά αμινοξέα όπως η τυροζίνη και η τραΐνη που συνδέονται με διπλούς δεσμούς. Έχουν την ιδιότητα της απορρόφησης του υπεριώδου φωτός, η κορυφή απορρόφησης του είναι στο μήκος κύματος 280nm, και η τιμή της φωτικής πυκνότητας απορρόφησης στο μήκος κύματος αυτό είναι θετικά αναλογική με τη συγκέντρωσή του, επομένως μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βάση για την ποιητική και ποσοτική μέτρηση της πρωτεΐνης, γι 'αυτό το λόγο, η μέθοδος απορρόφησης υπεριώδου στο μήκος κύματος 280nm χρησιμοποιείται συνήθως για τη συνεχή παρακολούθηση της συγκέ Ωστόσο, επειδή η περιεκτικότητα σε τυροζίνη και τραζίνη σε διάφορες πρωτεΐνες είναι διαφορετική, για να προσδιοριστεί με ακρίβεια η ποσότητα, είναι απαραίτητο να συγκρίνεται η καθαρή πρωτεΐνη που πρέπει να μετρηθεί ως κριτήριο ή να είναι ήδη γνωστός ο συντελεστής αφαίρεσης φωτός ως αναφορά. Επιπλέον, πολλές μη πρωτεϊνικές ουσίες έχουν επίσης καθορισμένη απορροφητική ικανότητα σε μήκος κύματος 280nm και μπορεί να προκύψουν παρεμβολές. Οι επιπτώσεις αυτών είναι ιδιαίτερα σοβαρές από τα νουρεοξέα (πουρίνες και πυριμιναλίδες). Η απορρόφηση στα 280nm είναι 10 φορές ισχυρότερη (ανά γραμμάριο) από την πρωτεΐνη, αλλά

Η απορρόφηση του πυρηνικού οξέος είναι ισχυρότερη στα 254nm και η κορυφή της απορρόφησης είναι κοντά στα 254nm. Ο συντελεστής απορρόφησης του πυρηνικού οξέος στα 254nm είναι διπλάσιος από το 280nm, ενώ η πρωτεΐνη, αντίθετα, απορροφά τα υπεριώδη 280nm περισσότερο από την απορρόφηση των 254nm.

Συνήθως

Αναλογία απορρόφησης φωτός σε καθαρές πρωτεΐνες: A280/A254 1,8

Αναλογία απορρόφησης φωτός του καθαρού πυρηνικού οξέος: A280/A254 0,5

Ως εκ τούτου, όταν υπάρχουν ταυτόχρονα πυρηνικά οξέα στο διάλυμα πρωτεΐνης (όπως συμβαίνει με τα περισσότερα βιολογικά συστήματα), πρέπει να μετρηθεί ταυτόχρονα το OD254nm και το OD280nm. Στη συνέχεια, με βάση την αναλογία της απορρόφησης των δύο μήκων κύματος, η πραγματική περιεκτικότητα σε πρωτεΐνες υπολογίζεται με εμπειρική διόρθωση για να εξαλείψει την επίδραση του νουκλεϊκού οξέος.

Συγκέντρωση πρωτεΐνης: 1,45 x A280-0,74 x A254 (mg/ml)

Αυτός ο εμπειρικός τύπος δημιουργήθηκε από μια σειρά δεδομένων που προσδιορίζονται από ένα μείγμα πρωτεΐνης (ελονολαζής μαγιάς) και νοκλεϊκού οξέος (νοκλεϊκού οξέος μαγιάς) σε γνωστές διαφορετικές συγκέντρώσεις.

Ρυθμίσεις συστήματος